雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計的雙光束設計有效補償了光源強度波動(dòng)、電子元件不穩定以及雜散光等因素的影響。在實(shí)際測量中，光源可能會(huì )因長(cháng)時(shí)間使用、電壓波動(dòng)等原因導致光強變化，而參比光束與樣品光束同時(shí)受這些因素作用，在后續計算中相互抵消，確保吸光度測量準確，尤其適用于長(cháng)時(shí)間連續監測或對微弱吸光變化敏感的實(shí)驗，如痕量物質(zhì)分析。
 

　　能實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)地對樣品測量進(jìn)行校正。在復雜樣品前處理或反應過(guò)程中，若樣品池透光性、溶液折射率等發(fā)生微小改變，參比光束可即刻反映這些非吸光本質(zhì)變化，及時(shí)調整測量基準，保證每一時(shí)刻測量數據的準確性，這對于動(dòng)力學(xué)研究、在線(xiàn)過(guò)程監測意義重大，可準確捕捉反應進(jìn)程中物質(zhì)濃度的瞬時(shí)變化。
 

　　相較于單光束儀器，雙光束分光光度計在低濃度與高濃度樣品測量上表現更優(yōu)。低濃度時(shí)，可憑借參比光束準確扣除背景噪聲，放大微弱吸光信號；高濃度樣品則通過(guò)調節參比與樣品光束平衡，避免信號飽和，實(shí)現從微量到常量乃至痕量物質(zhì)的寬范圍定量分析，滿(mǎn)足多樣化科研與檢測需求。
 

　　雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計的測定步驟：
 

　　1.準備階段：
 

　　-檢查儀器：確保分光光度計已經(jīng)連接并通電，檢查儀器的燈源是否正常工作，以及光譜儀的路徑是否干凈。如果需要校準儀器，根據儀器的使用說(shuō)明進(jìn)行校準操作。
 

　　-準備樣品：將需要測試的樣品制備好，例如需要測定蛋白質(zhì)的含量，就要將蛋白質(zhì)樣品用適當的緩沖液稀釋到合適的濃度。注意樣品應透明且沒(méi)有顆粒物質(zhì)，以避免干擾測量結果。同時(shí)，準備參比溶液作為對照，參比溶液應與待測樣品具有相似的性質(zhì)，但不含待測物質(zhì)。
 

　　2.測量操作：
 

　　-測量背景空白：將純溶劑(如水或有機溶劑)置于樣品室中，執行背景掃描以記錄純溶劑的光譜，確保記錄到的背景光譜清晰并且沒(méi)有異常。
 

　　-測量樣品：將含有樣品的溶劑溶液置于樣品室中，執行樣品掃描以記錄樣品的光譜，確保樣品光譜的記錄清晰，并且在正常范圍內。
 

　　3.數據處理：
 

　　-根據測量得到的吸光度數據，結合標準曲線(xiàn)或已知濃度的樣品數據，計算待測樣品的濃度或其他相關(guān)參數。